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BD培養(yǎng)基的配制講訴

更新時(shí)間:2014-12-29  |  點(diǎn)擊率:2553


   BD培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。
  1.配料

  配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱(chēng)取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋》。

  2.溶解

  淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

  3.調(diào)PH

  用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

  4.過(guò)濾

  濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。

  5.分裝

  一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

  (1)三角瓶

  若作靜置培養(yǎng),則100 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,zui多不能超過(guò)150 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20 ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。

  (2)試管分裝

  液體培養(yǎng)基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;

  固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。

  6.包扎

  分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

  7.滅菌

  按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。

  8.擺斜面

  滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。

  9.貯存

  培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

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